Фенотипирование эритроцитов по антигенам системы Rh и Kell

Фенотипирование эритроцитов по антигенам системы Rh и Kell

Условия для иммунофенотипирования лимфоцитов – для чего его проводят?

Одним из методов клинической диагностики является исследование крови способом иммунофенотипирования лимфоцитов. В его основе – реакция между антителами и антигенами, которая используется для определения типов клеток крови, взятых из образцов биологического материала – крови, лимфатических узлов или костного мозга.

Анализ проводится с использованием специальных маркеров или меток, которые присоединяются к антигенам клеток. С помощью лабораторного оборудования отслеживают маркеры, производят подсчет клеток крови. Знание количества каждой из них позволяет квалифицировать опухолевые заболевания, подтвердить диагноз пациенту с определением конкретного его типа, например: достоверно установить вид лимфомы, лейкоза. Такая точная диагностика позволяет сделать выбор наиболее эффективной схемы лечения.

Метод исследования, условия, необходимые для проведения

Иммунофенотипирование – это исследование лимфоцитов, которое помогает увидеть клетки крови, распознать их принадлежность к определенному виду. Исследование проводят с использованием современного диагностического оборудования – цитофлюориметров или особых микроскопов, способных опознавать люминесцирующие составляющие, которые помогают различать разновидности люминесцирующих кровяных телец, вести точный их подсчет в каждой пробе. Оборудование позволяет опознать каждую из меток. Маркирование клеток – это добавление в пробу антикоагулянта (реагент К2ЭДТА).

Забор образца для анализа производится из вены в области локтевого сустава. Для точного результата пациент должен соблюсти условия – проба берется натощак в утреннее время. В некоторых случаях допускается легкий прием пищи за 4 часа до процедуры, пациенту можно выпить небольшое количество обычной воды. Занятия спортом накануне диагностики или прием алкоголя запрещен, нарушение запрета приводит к искаженным результатам анализа. Повышенная психоэмоциональная нагрузка недопустима.

Для взятия крови специалист использует вакуумную пробирку. Ее применение позволяет достичь точного результата исследования, снизить болевые ощущения, точно произвести соотношение биологического материала и реагента.

После того, как образец поместили в пробирку, лаборант перемещает взятую пробу с антикоагулянтом, для этого требуется 10 раз медленно перевернуть емкость.

Для хранения и транспортировки материала для анализа требуется соблюдение условий: температурного режима при хранении образца от 18 до 23°С, сохранения положения пробирки – вертикально. Срок ожидания результатов не превышает 24 часов от взятия пробы. Время проведения исследования – 4 часа.

Сбор биоматериала для анализа

Количественный состав каких клеток отражает результат анализа?

В ходе проведения исследования специалисты клинической лаборатории отслеживают показатели в периферической крови пациента, возможные поражения. На бланк анализа заносят показатели:

  1. Абсолютное количество лимфоцитов, имеющих здоровое округлое ядро без патологий.
  2. Содержание Т-клеточных лимфоцитов – ядро этого вида кровяных телец образуется и созревает в тимусе или вилочковой железе. Обеспечивает иммунную реакцию организма в определенных условиях, осуществляет контроль над гуморальным ответом организма – работой В-лимфоцитов, которые образовывают антитела. Обозначают ядро Т-клеточного лимфоцита как CD3+.
  3. Количественное значение Т-хеплеров (ядро обозначается CD3+CD4+) – разновидности Т-лимфоцитов, оптимальное количество которых в крови способствуют усилению иммунного ответа организма на поражение чужеродным антигеном, их 2 типа. Т-клеточный хелпер первого типа является «защитником» от опухолевых новообразований, вирусных агентов, участвует в защитных воспалительных реакциях. Второй Т-клеточный тип обеспечивает взаимосвязь с гуморальным иммунитетом, участвует в выработке иммуноглобулина Е – веществе, воздействующим на агрессивные аллергены внешней среды, смягчает поражение ими.
  4. Количество Т-цитотоксических лимфоцитов, ядро которых принято обозначать как CD3+CD8+. Такие лимфоциты распознают поражение клеток собственного организма и проводят их лизис или растворение. Таким способом организм борется с опухолевыми тканями, с поражением бактериями, которые паразитируют на клеточном уровне. Ядро Т-цитотоксического лимфоцита – важный компонент иммунитета, направленного на уничтожение вирусов.
  5. В-лимфоциты, обозначаемые символами СD19+, вырабатывают активные вещества (антитела), действие которых направлено на поддержание гуморального иммунитета.
  6. Количество ЕК-клеток, их ядро обозначается как CD3-CD16+CD56+. Их называют естественными, или натуральными, киллерами. Такое название определяет их неиммунная цитологическая активность, которая направлена на клетки-мишени, имеющие неопластические изменения.
  7. Т-ЕК (ЕКТ) – клетки, ядро которых имеет естественную киллерную активность, защищают от поражения клеток, имеющих качества и признаки Т-лимфоцитов.
  8. Иммунорегуляторный индекс, который показывает соотношение Т-хелперов и Т-цитотоксических клеток в крови, обозначается в анализе в виде соотношения CD3+CD4+/CD3+CD8+.
Читайте также:  МКБ 10 - Другие врожденные аномалии пороки развития сердца (Q24)

Когда назначают исследование?

Фенотипирование видов лимфоцитов назначают для диагностики ряда заболеваний. Иммунологи назначают исследование, если имеются основания заподозрить одни из них или при наличии «ярких» признаков других. Например: расшифровка количества лимфоцитов с определенным фенотипом понадобится при:

  • инфекционных заболеваниях, поражении хронического характера или если болезнь имеет затяжной характер;
  • аллергических реакциях организма;
  • проявлении устойчивых признаков и симптомов, указывающих на иммунодефицит врожденного или приобретенного свойства;
  • подозрении на опухолевые образования доброкачественной или злокачественной природы;
  • заболеваниях аутоиммунного типа, спровоцированных расстройством защитной системы, поражением собственного организма;

Диагностика периферической крови требуется в других случаях. Ее назначат перед серьезным оперативным вмешательством, которое требуется больному в плановом порядке. При иммунофенотипировании врач узнает все процессы иммунного характера, происходящие у конкретного больного, что позволяет скорректировать защитные процессы, избежать клеточного поражения, и нормализовать их работу. Большое значение для врача имеют показатели различных видов кровяных телец, Т-клеточный состав крови в послеоперационный период, особенно в случаях с развитием патологических процессов.

Метод применяют и для оценки состояния человека, которому требуется трансплантация органов или проведена операция – анализ на иммунофенотипирование проведут на подготовительном этапе и во время послеоперационного восстановления, чтобы предупредить поражение и отторжение органа. Направление на анализ получают пациенты, лимфоциты которых могут изменить качественный и количественный состав из-за лечения заболеваний медикаментами определенных групп – иммуномодуляторами, иммунодепрессантами или цитостатиками.

Нормы и референсные значения содержания в крови частиц определенного вида зависят от возраста пациента. Врачи для оценки показателей используют специальные таблицы, в которых указаны оптимальные значения, пределы отклонений.

Какие проблемы отражают повышенные и пониженные Т-клеточные лимфоциты

Результат анализа покажет отклонение от нормы по количеству Т-клеточных лимфоцитов. Повышение их количества свидетельствует об иммунном воспалении, поражении или гиперактивности защитных процессов пациента. Такое превышение нормы вызывают заболевания – лимфолейкоз (острая и хроническая стадии), ряд вирусных и бактериальных инфекций в начале развития болезни. Увеличение Т-лимфоцитов возможно при изменении характера заболевания, переход его в хроническую форму.

Если у обследуемого абсолютное число Т-клеточных лимфоцитов снижено, говорят о развитии иммунологического паралича. Он сопровождает воспалительный процессы, может указывать на развитие злокачественных опухолевых новообразований. Такой показатель выявляется, если больная сердечная мышца – миокард, при некоторых сложных травмах, его снижение вызывает курение.

Колебание числа В-лимфоцитов

Увеличение числа В-лимфоцитов сигнализирует о поражении организма воспалительным процессом, развивающимся в острой или хронической стадии. Его природа – аллергического, аутоиммунного или инфекционного характера. Эти лимфоциты увеличиваются из-за В-лимфолейкоза, бронхиальной астмы, муковисцидоза, больной печени и при хронических патологиях. Увеличенные показатели по В-лимфоцитам в анализе отражают восстановление после инфекций, перенесенных в острой и тяжелой форме.

Если число В-лимфоцитов не соответствует нижним пределам нормы, при проведении дополнительной диагностики врач подтвердит пациенту развитие опухолевых новообразований, острые вирусные инфекции или инфекции бактериального типа, развитие очагов воспаления в организме больного.

Отклонения показателей естественных киллеров

Повышенному уровню естественных киллеров способствуют патологические процессы, связанные с:

  • запуском онкологических процессов;
  • тяжелым течением воспалительного процесса, воспалительные заболевания в хронической стадии;
  • с избыточной выработкой антигенов, борющихся с бактериальным или вирусным процессом.
Читайте также:  Уролесан® (Urolesan) - инструкция по применению, состав, аналоги препарата, дозировки, побочные дейс

Содержание в клетках крови естественных киллеров может быть снижено из-за повышения уровня в крови Т-лимфоцитов и связано с процессами, вызывающими такое повышение.

Показатели Т-цитотоксических лимфоцитов

Если значение показателя CD8+ – в превышающих норму цифрах, закономерно заподозрить опухолевое заболевание, вирусный процесс в активной стадии (при развитии вирусной, грибковой или внутриклеточной инфекции, заболеваний подобного типа).

Сниженные значения Т-цитотоксических лимфоцитов в результатах анализа предупреждают о процессах, развивающихся на фоне аутоиммунных болезней. Такой процесс подтверждает атаку аллергенов, развитие аллергии на момент обследования.

Как действует ядро зрелого Т-цитотоксического лимфоцита

Какие процессы определяются по уровню Т-хелперов

Повышение содержание Т-хеплеров свидетельствует об остром воспалительном процессе в активной стадии. Иммунное воспаление отражает увеличение Т-хеплеров первого типа, рост показателя по второму типу определяет наличие воспалительного процесса аллергической природы. Обострение аутоиммунной патологии определяется, если Т-хеплеры обоих типов увеличены.

Снижение Т-хелперов происходит из-за состояния иммунологического паралича, выявляет иммунодефицит вторичного типа у больного.

Отклонения значений по уровню Т-ЕК клеток

Количество Т-ЕК клеток повышается, увеличиваясь по отношению к референсным значениям их содержания в крови по причине:

  • наличия хронических воспалительных процессов с длительным периодом воздействия на иммунную систему;
  • воспалительных процессов, сопровождаемых тяжелым протеканием, осложнениями при лечении;
  • сохранение инфекции в активном состоянии в клетках организма на протяжении значительного периода времени.

Сниженные лимфоциты такого вида не отображают значимые процессы, не являются важными для диагностики.

Использование метода иммунофенотипирования лимфоцитов позволяет проводить диагностику патологий, заподозрить развитие опасных, опухолевых болезней. Метод является безопасным для обследуемого, не требует значительных финансовых затрат.

Анализ крови

Группы крови, антигены эритроцитов Kell, фенотипы

Группа крови человека зависит от набора антигенов, локализованных на мембранах его эритроцитов. Всем известна система AB0, когда на красных кровяных клетках выявляются белки А, В по-отдельности или вместе, либо их совсем нет, но существуют и другие способы деления, например, по антигенам Kell, D, E и другим.

Белок D, которого может не быть

Резус-фактор в течение жизни не меняется. Он либо есть, либо – нет. За его наличие (присутствие на эритроцитах антигена) отвечает ген, обозначаемый буквой D. Так как в генотипе всегда парный набор хромосом, то у резус-положительных индивидуумов Rh + набор генов, отвечающих за этот признак — DD или Dd. Большие буквы обозначают доминантный ген, маленькие – рецессивный. Соответственно у Rh — людей в хромосомном наборе присутствуют только dd, т.е. белок антиген вообще не синтезируется.

Если к резус-отрицательному человеку попадают эритроциты несущие резус-фактор, то на чужеродный белок начинают вырабатываться антитела, отчего чужие эритроциты разрушаются, возникает гемолиз. Это может происходить при гемотрансфузии, либо когда Rh — мама беременна Rh + плодом. В последнем случае, хотя кровотоки мамы и ребенка не смешиваются, но часть эритроцитов плода могут попасть к матери. Поэтому и может возникнуть гемолитическая болезнь новорожденных, причиной которой является резус-конфликт.

Слабо положительный D, что значит weak Rh + ?

Существует понятие weak Rh + . Это означает что антигены D на мембранах эритроцитов выражены слабо. При этом в отношении weak Rh + пациентов предусмотрены особые правила:

  1. Они считаются резус-отрицательными, если являются реципиентами при переливании крови. Дело в том, что при попадании эритроцитов с нормально выраженным фактором D организм людей с weak Rh + начинает вырабатывать антитела. Т.е. переливать им можно только кровь от резус-отрицательных людей.
  2. Во время беременности резус положительным плодом мама со слабо-положительным Rh считается резус-положительной, так как в ее организме не вырабатываются антитела к единичным клеткам, попадающим в ее кровь от эмбриона.
  3. Считаются резус-положительными, если сами являются донорами. Т.е. их кровь можно перелить людям с хорошо выраженным резус-фактором.
Читайте также:  Задняя корковая атрофия - Posterior cortical atrophy

Кроме того, устаревшие методики определения резуса у таких сложных пациентов могут показать отрицательный результат. Отсюда миф, бытующий среди некоторых людей о том, что резус фактор может меняться с течением жизни. Это не так. Просто у weak Rh + его не всегда можно выявить малочувствительными методами.

Фенотипы и Kell антигены

Под термином резус-фактор подразумевается антиген D, но в резус системе крови существуют и другие белки (выявлено около 50), наиболее значимыми из которых при трансфузиях являются С, с, Е, е, d. Эти белки также присутствуют на мембранах эритроцитах, определение их важно, если у пациента уже были переливания с осложнениями. В зависимости от их сочетания, наблюдаются различные фенотипы, например, CcDEe, CcDee. Редкий фенотип – ссDEE.

Существуют также антигены системы Kell. При попадании положительных эритроцитов реципиенту с отрицательными Kell, у него начинают вырабатываться антитела, приводящие к осложнениям после гемотрансфузии. Поэтому кровь с эритроцитами переливают только от К — доноров, как положительным, так и отрицательным реципиентам по антигенам Kell.

По иммуногенности ( а следовательно и риску осложнений после трансфузий) можно сделать градацию антигенов резус группы и Kell (по убыванию):

  1. Kell (К).
  2. с.
  3. Е.
  4. С.
  5. е.

Литература: Н.В. МИНЕЕВА. ГРУППЫ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА. 2004

Приказ об утверждении инструкций по иммуносерологии: http://docs.cntd.ru/document/901705270

Posted on Август 5, 2019 by olla
Categories: изосерология

Редкие фенотипы

Понятие фенотип антигенов эритроцитов человека включает в себя набор антигенов разных систем групп крови, расположенных на поверхности эритроцитов. Этот набор для каждого человека индивидуален. Поэтому при переливании крови и эритроцитарной массы необходимо учитывать совместимость не только по эритроцитарным антигенам системы АВО и резус-фактору, но и по другим эритроцитарным антигенам различных систем.

Антигены системы резус встречаются со следующей частотой: Д – 85 %; С – 70 %; с – 80 %; Е – 30 %; е – 97,5 %. Антигены системы резус обладают способностью вызывать образование иммунных антител. Наиболее активным в этом отношении является антиген Д, который и подразумевается под термином «резус – фактор». Именно по наличию или отсутствию антигена Д все люди делятся на резус – положительных и резус – отрицательных.

Распределение фенотипов резус-системы у D-положительных доноров

Фенотипы %
CcDee 38
CcDEe 17
CCDee 22
ccDEe 16,6
ccDEE 2,4
ccDee 3,4
CcDEE 0,08
CCDEe 0,3

Редким фенотипом крови считается фенотип редко встречающийся в популяции. К примеру, фенотип ccddee – резус-отрицательный имеют около 15% населения, а фенотип ссDEE – 2%, (отсутствует антиген е). Фенотип крови по системе РЕЗУС (Rh) отрицательный — ссddee или (C-,c+,C W -, D-,E-,e+) относится к редким фенотипам крови. При необходимости переливания крови реципиенту, имеющего такой фенотип, это становится жизненно важно, так как на отсутствующие у реципиента антигены, организм может вырабатывать антитела.

Чтобы избежать всевозможных осложнений, каждому человеку необходимо знать свой фенотип крови. Сделать это можно в специализированной иммуносерологической лаборатории ККЦК №1, где произведут фенотипирование образца вашей крови по всем иммуногенно- значимым системам крови.

© 2013 Красноярский Краевой Центр Крови №1

Ссылка на основную публикацию
Уход за больным с переломом шейки бедра; Про Паллиатив
Почему при переломе шейки бедра болит колено Стоит ли обращать внимание на боль в колене при переломе шейки бедра? Многие...
Ундевит; инструкция по применению, описание, вопросы по препарату
Ревит: инструкция по применению и для чего он нужен, цена, отзывы, аналоги Ревит представляет собой поливитаминное медикаментозное средство, содержащее аскорбиновую...
Универсальный алгоритм оказания первой помощи — Первая помощь — МЧС России
Мероприятия по оказанию первой помощи пострадавшим на производстве В соответствии с Федеральным законом «Об основах охраны здоровья граждан РФ» и...
Уход за имплантами зубов до и после установки рекомендации врача
Как чистить зубы после имплантации зубов Соблюдение всех рекомендаций врача является залогом долгой службы имплантированного зуба. Прием пищи после операции...
Adblock detector